| Das Mikrobiom metabolisiert Substanzen, je nach individueller Zusammensetzung
der Bakterien, von Mensch zu Mensch unterschiedlich. Dies kann einen
bedeutenden Einfluss auf den Effekt einer Substanz haben. Run Chang Wan (RCW)
ist eine traditionelle chinesische Kräutermischung, die häufig bei Obstipationen
Anwendung findet. Die genauen Wirkmechanismen sind jedoch weitgehend unklar.
Herkömmliche Zellkulturen stellen die in vivo Bedingungen nur unzureichend dar,
wodurch mögliche Interaktionen zwischen einem Agens, einem Epithelgewebe und
den sich darauf befindenden Mikroben nicht beobachtet werden können. Mit einer
Air Liquid Interface (ALI) Kultur und beigefügten Darmbakterien, versuchten wir
diese Lücke zu schließen und möglichst realistische Versuchsbedingungen zu
schaffen.
Die ALI-Kultur nutzt eine Einlage mit einer Polycarbonat Membran, auf der Zellen
kultiviert werden. Auf der apikalen Seite haben die Zellen Luftkontakt und auf der
basalen Seite stehen sie mit einem Nährmedium in Kontakt. Diese Bedingungen
führen zu einer Differenzierung der Zellen. Zur Herstellung eines Colonepithels
wurden zwei Adenokarzinomlinien des Colons, CaCo2 und HT29, im Verhältnis 3
zu 1 gemischt. In der ALI Kultur bildeten die Zellen ein strukturiertes Epithel, das
Schleim enthielt. Den Epithelien wurde unter anaeroben Bedingungen eine 10 %-
ige Stuhlsuspension beigefügt und anschließend mit unterschiedlichen RCW-
Konzentrationen inkubiert.
Dies führte zu starken Zellschädigungen, welche sowohl in der RNA-Messung als
auch histologisch nachweisbar waren, wobei lediglich in Abwesenheit von RCW
genug Zellen überlebten, um erfolgreich fixiert und gefärbt zu werden.
Weitere Studien werden nötig sein, um eine Methode zu finden, die eine erfolgreiche
Kombination von Colon ALI Kulturen mit einem Microbiom möglich macht. |
