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Bibliografische Informationen
 Effekte von Siponimod auf inflammationsbezogene astrogliale Genexpression  
 Einführung

Siponimod ist ein Sphingosin 1 Phosphat (S1P) Rezeptor Modulator der für die

Behandlung von sekundär-progressiver Multipler Sklerose (SP-MS) zugelassen ist.

Es konnte gezeigt werden, dass die Behandlung mit Siponimod Zytokin induzierte

kortikale Demyelinisierung in einem Ratten Modell verhinderte. Dieses Modell

spiegelt menschliche kortikale Läsionen von progressiven Multiple Sklerose (MS)

Formen und deren Hauptmerkmale wider. In der Behandlung von MS, ist der

bekannte Hauptwirkmechanismus von Siponimod, dass es den Ausstrom von

Lymphozyten aus den lympahtischen Organen und somit die Einwanderung in das

zentrale Nervensystem (ZNS) behindert. Kortikale Läsionen zeigen jedoch kein

gesteigertes inflammatorisches zelluläres Infiltrat. Das legt nahe, dass Siponimod

diese Läsionen über einen anderen Wirkmechanismus beeinflusst und direkt an den

ansässigen Gliazellen im ZNS wirken könnte. Daher war das Ziel dieser

Diplomarbeit zu untersuchen, ob Siponimod astrogliale entzündungsbezogene

Genexpression positiv beeinflusst und einen anti-entzündlichen Phänotyp fördert.

Methodik

Es wurde eine von Ratten stammende primäre gemischte Gliazellkultur die

Astrozyten, Mikroglia und Oligodendrozyten beinhaltete, generiert. Nach zehn

Tagen der Kultivierung, wurden die Kulturen in folgenden Konstellationen

behandelt: 1) Siponimod + Zytokine (Interferon gamma (IFNγ) +

Tumornekrosefaktor alpha (TNFα)), 2) Zytokine + Dimethylsulfoxid (DMSO), 3)

Siponimod, 4) DMSO und 5) Naiv. Nach einer 20-stündigen Behandlung, wurden

die Zellen geerntet und eine quantitative Echtzeit-Polymerase Kettenreaktion

durchgeführt. Die Effekte von Siponimod auf die mRNA-Expression von zwölf

entzüdungsbezogenen Genen wurde analysiert. Die relative Genexpression wurde

mittels der 2-ΔΔCTMethode unter Verwendung eines Referenz Genindex berechnet.

Die statistische Analyse wurde gemäß der Datenverteilung unter Verwendung von

parametrischen und nicht-parametrischen Verfahren durchgeführt.

Ergebnisse

Die alleinige Behandlung mit Siponimod reduzierte die mRNA-Expression von

Komplementfaktor C3 (C3) und die gleichzeitige Behandlung mit Siponimod und

Zytokinen reduzierte die Expression von Prostglandinsynthase 2 (PTGS2)statistisch signifikant im Vergleich zu allen anderen experimentellen Gruppen. Die

alleinige Behandlung mit Siponimod verringerte die Expression des ziliaren

neurotrophen Faktor (CNTF) statistisch signifikant im Vergleich zu allen anderen

Gruppen. DMSO beeinflusste die Genexpression in fünf aus elf untersuchten

Genen. Die anderen Gene zeigten keine statistisch signifikanten Änderungen in

ihrer Expression durch die Behandlung mit Siponimod.

Diskussion

Es konnte gezeigt werden, dass Siponimod die Genexpression von Gliazellen in

den gemischten Gliazellkulturen beeinflusst. Siponimod zeigte einen anti-

inflammatorischen Einfluss auf die Gliazellen in den gemischten Gliazellkulturen,

indem es die Geneexpression von C3 und PTGS2 reduzierte und somit die

Förderung eines anti-inflammatorisch Phänotyp. Daher konnte die Hypothese in

zwei der untersuchten Gene bestätigt werden. Jedoch wurde mit der Reduzierung

der Expression von CNTF ebenso ein pro-inflammatorischer Einfluss auf die

Gliazellen in den gemischten Gliazellkulturen entdeckt. Des Weiteren wurde ein

Einfluss von DMSO auf die mRNA-Expression der Gliazellen entdeckt, obwohl es

in einer niedrigen Konzentration von 0.02% verwendet wurde. Daher sollten weitere

detailliertere Studien durchgeführt werden, die den Einfluss von DMSO auf die

Genexpression von Gliazellen, insbesondere in niedrigen Konzentrationen,

untersuchen.  
 Siponimod; Multiple Sklerose; Genexpression; Gliazellen; sekundär-progressive Multiple Sklerose; primär-progressive Multiple Sklerose; Rattenmodell  
 
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Autorinnen*Autoren / Co-Autorinnen*Co-Autoren
  Stifter, Florian
Betreuende Einrichtung / Studium
  Universitätsklinik für Neurologie
 UO 202 Humanmedizin  
Betreuung / Beurteilung
  Ücal, Muammer; Priv.-Doz. PhD.
  Haindl, Michaela Tanja; Sen.Scientist Dr.scient.med. BSc MSc