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Medizinische Universität Graz    

Meine Abschlussarbeiten - Publikationen

Dissertation - Detailansicht
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Bibliografische Informationen
 Charakterisierung der Rolle von Glukagon und der Glukagonanalytik in der Physiologie  
 Hintergrund: Die präzise Glukagon-Quantifizierung ist essentiell für das Verständnis der Alpha-Zell-Dysfunktion. Proteolytische Instabilität und fehlende standardisierte präanalytische Protokolle behindern die Forschung. Diese Arbeit etabliert ein evidenzbasiertes Referenzprotokoll und charakterisiert Nüchternwerte bei verschiedenen metabolischen Zuständen.

Methoden: Stabilisierung (BD P800, EDTA-Aprotinin, K3EDTA-Röhrchen; alle Becton Dickinson) und Adsorption (Glas-, Greiner-, Sorenson-, LoBind-Vials) wurden evaluiert. Assay-Spezifität wurde mittels Sandwich ELISA (Mercodia®), RIA (Radioimmunoassay; Millipore®) und elektrochemilumineszenz-basierten Meso Scale Discovery® (MSD)-Assay verglichen. Die klinische Anwendbarkeit wurde in der Comparative Glucagon (CoGlu)-Studie (n=60: gesunde Kontrollen, T1D, T2D) durch den Vergleich von ELISA und RIA beurteilt und unter Verwendung des ELISA auf eine gepoolte Kohorte (n=158: Gesund, T1D, T2D, Adipositas) ausgeweitet. Die Statistik umfasste ANOVA/Kruskal-Wallis und Bland-Altman-Plots.

Ergebnisse: BD P800-Röhrchen stabilisierten Glukagon für 6 h bei Raumtemperatur (102% Wiederfindung). K3EDTA-Röhrchen wiesen einen Abbau von bis zu 67% auf. Sorenson-Vials zeigten 17% Adsorptionsverlust, während Glas-, Greiner- und LoBind-Vials die Probenintegrität bewahrten. Der ELISA detektierte intaktes Hormon, der RIA zeigte Kreuzreaktivität. Die Wiederfindung sank nach zwei Einfrier-Auftau-Zyklen (< 80%). Klinisch bestand ein systematischer Bias zwischen den Assays. Der ELISA zeigte bei T1D und Gesunden vergleichbare Werte, während eine Hyperglukagonämie bei Adipösen und T2D-Patienten gleichermaßen vorlag.

Schlussfolgerung: Das robuste Standardprotokoll umfasst: sofortige Stabilisierung in BD P800-Röhrchen, Lagerung in LoBind-, Greiner- oder Glas-Vials und begrenzte Einfrier-Auftau-Zyklen. Hochselektive, standardisierte Labormethoden sind unerlässlich für die mechanistische endokrine Forschung und die Harmonisierung von Inkretin-Studien.

 
 Glukagon; Glukagon-Assay; Präanalytische Stabilität; ELISA; RIA; Typ 1 Diabetes Mellitus; Typ 2 Diabetes Mellitus  
 
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 Diabetologie
 Endokrinologie
 Klinische Chemie
Autorinnen*Autoren / Co-Autorinnen*Co-Autoren
  Brunner, Martina; Bakk. rer. nat. MSc
Betreuende Einrichtung / Studium
  Universitätsklinik für Innere Medizin
 UO 790 202 Dr.-Studium der medizin. Wissenschaft; Humanmedizin  
Betreuung / Beurteilung
  Sourij, Harald; Univ.-Prof. Priv.-Doz. Dr.med.univ. MBA
  Obermayer-Pietsch, Barbara; Univ.-Prof. Dr.med.univ.
  Svehlikova, Eva; Univ. FÄ Dr.med. PhD.
  Raml, Reingard; Dipl.Ing.in Dr.in