| Krebserkrankungen der Gallenwege (BTC) zeichnen sich durch eine hohe Sterblichkeitsrate und begrenzte Behandlungsmöglichkeiten aus, was den Bedarf an neuen molekularen Zielen für die Entwicklung therapeutischer Strategien unterstreicht. Um regulatorische Netzwerke mit Beteiligung nicht-kodierender RNAs zu identifizieren, konzentrierten wir uns auf die miR-200 Familie mit ihrem Einfluss auf die epithelial-mesenchymale Transition (EMT) und ihrer kürzlich beschriebenen Rolle in Immunevasions-Mechanismen, wie der Expression von Immuncheckpoints (ICs). Unser Ziel war es, die Beziehung zwischen EMT und Immunevasion in BTC zu untersuchen, mit der miR-200 Familie als potenzielle regulatorische Schnittstelle.
Anfängliche Analysen zeigten einen vielversprechenden Zusammenhang zwischen der Überexpression von miR-200c-3p mittels microRNA-Mimics und der Hochregulierung wichtiger ICs wie LGALS9, PD-L1 und IDO1. Als wir jedoch feststellten, dass weder der Knockdown von miR-200c-3p, noch die stabile Überexpression von miR-200c-3p oder die Verwendung eines miR-200c-3p-Mimics eines anderen Herstellers Auswirkungen auf ICs hatten, hinterfragten wir unsere ursprünglichen Ergebnisse. Wir vermuteten, dass die beobachtete Hochregulierung von ICs nicht durch physiologische Effekte von miR-200c-3p, sondern durch unerwartete Effekte des miR-200c-3p-Mimics verursacht wurde.
Im Rahmen der Untersuchung möglicher unspezifischer Effekte identifizierten wir eine doppelsträngige (ds)RNA-abhängige angeborene Immunantwort als Hauptursache. Der miScript miR-200c-3p-Mimic, nicht aber miR-200c-3p selbst, führte zu einer Hochregulierung von dsRNA-Sensoren, Interferonen (IFNs) und antiviralen Effektoren. Weitere Analysen mit dem dsRNA-Analog Poly(I:C) zeigten das Vorhandensein von auto- und parakrinen IFN-β Signalen, die zu einer Aktivierung des Janus-Kinase/Signaltransducer und Aktivator der Transkription (JAK/STAT)-Signalweg führten. JAK/STAT Inhibierung hob die Auswirkungen der dsRNA-abhängigen Immunantwort auf die Hochregulierung von ICs auf, wodurch dieser Signalweg als wesentliche Verbindung zwischen einer angeborenen Immunantwort und der Expression von ICs wie LGALS9, PD-L1 und IDO1 identifiziert werden konnte.
Interessanterweise wurden manche dieser dsRNA-vermittelten Effekte auch bei der Behandlung von BTC Zellen mit Cisplatin beobachtet. Während die Mechanismen, die hinter der Cisplatin-vermittelten IC-Hochregulierung stehen, noch weitgehend ungeklärt sind, deuten unsere Daten auf eine mögliche Beteiligung der dsRNA-vermittelten angeborenen Immunität hin - ein Thema, mit dem sich zukünftige Forschungsprojekte befassen werden. |
