| HDL weist verschiedene gefäßschützende Eigenschaften auf inklusive der Förderung des Reversen Cholesterin Transports (RCT) sowie der Inhibierung der LDL Oxidation. Die Wirkung der endothelialen Lipase (EL) führt zu einer Senkung des HDL-C Plasmaspiegels. Darüber hinaus hat EL die Fähigkeit sowohl die strukturellen als auch die funktionellen Eigenschaften des HDLs zu beeinflussen.
In der gegenwärtigen Studie wurde erstens mit Hilfe von geeigneten in vitro und in vivo Experimenten, die Wirkung von EL auf die Zusammensetzung und die Cholesterin Efflux Kapazität (CEK) von Serum, Apolipoprotein B-depletiertem Serum und isoliertem HDL untersucht. Dazu wurde EL mittels Adenovirus entweder in vitro oder in vivo überexprimiert. Die Analyse der CEK erfolgte mittels 3H-Cholesterin markierten J774 Macrophagen unter basalen Bedingungen oder unter Hochregulierung des ABCA1 Transporters.
EL Überexpression in vitro in Zellen, welche mit Human- oder Mausserum inkubiert wurden, führte zu einer verbesserten CEK mit Serum und ApoB-DS, jedoch zu einer verringerten CEK mit isoliertem HDL. Dieses Resultat wurde sowohl durch die Entstehung von lipidarmen ApoA-I, als auch durch eine veränderte Lipidzusammensetzung und einer verminderten HDL Größe (nur Human) erzielt. Im Gegensatz wurde durch Überexprimierung von Human und Maus EL in Mäusen eine Abnahme der CEK mit Serum und ApoB-DS, jedoch eine unveränderte CEK mit isoliertem HDL, beobachtet. Dies könnte sowohl durch eine starke Verringerung des HDL-C und ApoA-I Spiegels im Serum und eine veränderte Lipidzusammensetzung des Serums und HDLs als auch durch eine unveränderte HDL Größe des HDLs erklärt werden.
Der Einfluss von EL auf die CEK von Serum und HDL reflektiert sowohl die strukturellen und kompositionellen Eigenschaften als auch die Menge des EL modifizierten HDLs. Unsere Studie konnte den Einfluss von experimentellen Modellen auf die strukturellen und funktionellen Charakteristika des EL modifizierten HDLs zeigen. Es stellte sich heraus, dass die Wirkung von EL auf Human- und Mausserum in vitro zu einer Akkumulierung von lipid-armen ApoA-I führt.
Zweitens, wurde der Zusammenhang zwischen Zusammensetzung, Struktur und der antioxidativen Kapazität des in vitro generierten EL-HDL analysiert. Die antioxidative Wirkung des EL-HDLs wurde durch die Analyse der Kapazität, die CuCl2 induzierte LDL Oxidation und MDA Akkumulierung zu dämpfen, bestimmt.
Im Vergleich zur Kontrolle, konnte eine signifikant verlängerte Lag Phase und reduzierte MDA Akkumulation festgestellt werden. Durch die Überexprimierung von EL entstanden kleinere HDL Partikel mit veränderter Lipidzusammensetzung. Trotz der verbesserten antioxidativen Kapazität konnte ein verminderter PON1, LCAT und PAF-AH Gehalt nachgewiesen werden. Die Verwendung von enzymatisch inaktiver EL führte zu einer Anreicherung des PON1 Gehaltes, wodurch auf die Wichtigkeit der lipolytischen EL Aktivität für die Verdrängung von PON1 am HDL Partikel hingewiesen werden konnte. Kleine EL-HDL Partikel zeigten im Vergleich zu großen eine höhere antioxidative Wirkung, wobei die kleinsten den niedrigsten PON1 Gehalt aufwiesen. Die Entfernung von lipolytischen Produkten führte zu einer geringeren ausgeprägten antioxidativen Kapazität von EL-HDL. Im Vergleich zur Kontrolle konnte im EL-HDL eine erhöhte Oxidationsrate von ApoA-I Met136 beobachtet werden. Chloramin T hob die antioxidative Wirkung sowohl von EL-HDL als auch von Kontroll-HDL auf, wobei die Oxidationsrate von EL-HDL im Vergleich zum Kontroll-HDL signifikant geringer war.
Zusammenfassend konnte der Einfluss von EL auf die antioxidative Wirkung von HDL, auf eine EL induzierte Veränderung der HDL Größe und Lipidzusammensetzung, insbesondere durch die Anreicherung von Spaltprodukten in EL-HDL, zurückgeführt werden. HDL assoziierte Enzyme spielen demnach keine Rolle in der Förderung der antioxdativen Kapazität des HDLs. |
