Medizinische Universität Graz

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Bibliografische Informationen

Titel

Die Rolle von STIM1 und Orai1 für die Glukose induzierte Insulinsekretion aus beta-Zellen

Kurzfassung

Die Insulinsekretion aus den β-Zellen des Pankreas ist abhängig von der extrazellulären

Glukosekonzentration. Der letzte Schritt des Signalwegs von Glukosemessung bis

Insulinausschüttung ist ein Einstrom von Ca2+Ionen aus dem Extrazellularraum. Auch die

Proteine STIM1 und Orai1 führen über den Prozess des store operated calcium entry

(SOCE) zu einem Einstrom dieser Ionen. Das Ziel dieser Arbeit ist es, herauszufinden, ob

ein Zusammenhang zwischen dem speicherregulierten Kalziumeinstrom und der

Insulinsekretion existiert. Dazu wurden eine Kultur von Pankreaskarzinomzellen aus

Ratten (INS-1) gewählt und diese u.a. mit fluoreszenzmikroskopischen Techniken

charakterisiert. Es wurden diverse morphologische Änderungen der Zellen gezeigt. Ein

neues Verfahren diente der Messung der glukoseabhängigen ATP-Produktion in

Mitochondrien mittels FRET (Förster Resonance Energy Transfer). Weiterhin wurden

molekularbiologische Messungen zur Bestimmung der abgegebenen Insulinmenge

angewandt und der Mercodia Insulin ELISA für die Messungen in kultivierten Zellen

adaptiert. Ferner wurden zellbiologisch die Expressionslevel der Proteine mit

Überexpression und Knockdown von STIM1 und Orai1 verändert.

Diverse Methoden zur Normalisierung der Insulinproduktion wurden verglichen, wobei

sich die durchschnittliche Zelldichte am besten bewährte. Schließlich zeigte sich entgegen

den Erwartungen sowohl bei Überexpression von STIM1 und Orai1, als auch bei STIM1

Knockdown eine signifikante Reduktion der Insulinsekretion.

Schlagwörter

SOCE; STIM1; Orai1; Insulin; GDIS; beta-Zelle

Anzahl Seiten

Publikationsjahr

2013

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