| Phospholipid transfer protein (PLTP) gilt als Schlüsselprotein in der Biogenese und Remodellierung von Plasma HDL. In der Literatur wurden HDL zahlreiche neuro-protektive Eigenschaften zugeschrieben. Wie unsere Arbeitsgruppe bereits zuvor berichtet hat, führt die Aktivierung des Liver-X Rezeptors (LXR) in einem in vitro Modell der Blut-Hirn-Schranke (BHS), bestehend aus primären Schweinehirnendothelzellen (pBCEC), zu erhöhtem Cholesterinefflux und zur Entstehung von HDL ähnlichen Partikeln. Diese Arbeit beschreibt die Synthese von PLTP, dessen Regulierung und Schlüsselfunktion im HDL Metabolismus an der BHS. In einem polarisierten in vitro Modell, welches die BHS simuliert, sekretierten pBCEC verstärkt aktives PLTP in das basolaterale (‚Gehirn parenchymale‘) Kompartiment. Bei LXR Aktivierung mit 24(S)-Hydroxycholesterin (ein zerebraler Cholesterin-Metabolit) und TO901317 (ein synthetische LXR Agonist) wurde die PLTP Expression und Phospholipid Transferaktivität bis zu maximal 2.5-fach erhöht. In C57/BL6 Mäusen wurde eine erhöhte PLTP Aktivität in BCEC bei Verabreichung von TO901317 festgestellt. Bei Zugabe von supraphysiologischen Konzentrationen von Glukose/Insulin in pBCEC unter simuliertem diabetischem Zustand detektierten wir einen bis zu 2,2-fachen Anstieg an PLTP Proteinlevel und eine Reduktion in PLTP mRNA (40%) und Aktivität (35%). Vorinkubation mit HDL3 und humanem Plasma PLTP resultierte in der Entstehung von kleineren und größeren HDL Partikeln mit einer bis zu 3-fachen erhöhten Kapazität für Cholesterin Efflux in pBCEC. Pre-β-HDL, welches mittels 2D-Immunoelektrophorese detektiert wurde, wurde von HDL3 in pBCEC Überständen generiert und zeigte eine 1,9-fache Erhöhung durch LXR- Aktivierung. Zusätzlich fanden wir, dass Silencing von PLTP (bis zu 75%) mittels siRNA zu einer Reduktion von apoA-I abhängigen (67%) und HDL3 (30%) abhängigen Cholesterinefflux in pBCEC führt. Des Weiteren wurde eine 1,8-fache Erhöhung von BACE1 Proteingehalt durch PLTP Silencing festgestellt. Behandlung mit HDL3 und aktiven PLTP führte zu einer signifikanten Reduktion (63%) von Amyloid-Beta (Aβ) Oligomerisierung in pBCEC. Zusammenfassend und basierend auf diesen Resultaten, schlagen wir eine aktive Rolle von PLTP im Lipidtransfer, Cholesterinefflux, HDL Biogenese und am Remodellierung und Aβ Metabolismus vor. |
