| Einleitung: Der Darm ist eine Quelle lokaler Glukokortikoidsynthese, welche relevant für die Erhaltung intestinaler Immunhomöostase ist. Enzyme, die an der intestinalen Steroidsynthese beteiligt sind, werden durch den Kernrezeptor (KR) LRH-1 reguliert. Der KR LRH-1 sowie die Enzyme der Steroidsynthese sind in entzündeten Bereichen des Kolons von Personen mit chronisch entzündlichen Darmerkrankungen (CED) schwächer exprimiert als in gesundem Gewebe. Fecal microbiota transplantation (FMT) ist eine vielversprechende therapeutische Option für CED Patientinnen und Patienten mit Colitis Ulcerosa. Wir stellen daher die Hypothese auf, dass das Darmmikrobiom die lokale Steroidsynthese beeinflusst.
Methoden: Um den Einfluss des Mikrobioms auf die intestinale Steroidsynthese zu bestimmen, verglichen wir verschiedene Abschnitte des Darms (Jejunum, Ileum und Kolon) von keimfreien und konventionellen Mäusen (jeweils n=5). Wir fokussierten uns auf die Analyse der Schlüsselenzyme der intestinalen Steroidsynthese Cyp11a1, Cyp11b1 und Hsd3b, welche alle durch LRH-1 reguliert werden. Um Expressionslevels zu testen, führten wir RT-qPCRs, Western Blots (WB) und Immunfluoreszenzfärbungen (IF) durch.
Resultate: Am deutlichsten sah man die Unterschiede auf Proteinebene bei Cyp11a1 und Cyp11b1, welche eine signifikant erniedrigte Expression in keimfreien Mäusen zeigten. Auf mRNA Ebene zeigten sich die deutlichsten Veränderungen bei Hsd3b1 und Hsd3b3, welche im Kolon von keimfreien Mäusen signifikant niedriger exprimiert waren. Im Gegensatz dazu waren diese Enzyme im Ileum von keimfreien Mäusen höher exprimiert. In der IF zeigte sich eine reduzierte Expression von Cyp11a1 im Kolon von keimfreien Mäusen.
Diskussion: Das Darmmikrobiom hat signifikanten Einfluss auf die Expression der Enzyme der Steroidsynthese. Cyp11a1 und Cyp11b1 sind deutlich reduziert in keimfreien Mäusen. Die Rolle von LRH-1 in Zusammenhang mit diesen Veränderungen ist zurzeit noch unklar und kann in weiteren Untersuchungen (z.B. LRH-1 Chromatin Immunpräzipitation) analysiert werden.
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